摘要 采用6种溶剂对番茄茎叶进行系统提取，以4种重要植物病原真菌进行室内抑菌活性测定。结果表明：每种提取液对供试菌都有较好的抑制作用，不同提取液对葡萄白腐病菌抑制率达83.93%~100%；对苹果腐烂病菌抑制率达63.99%~98.21%；对苹果轮纹病菌抑制率为25.42%~86.01%；对棉花枯萎病菌抑制率为29.46%~88.42%。整体表现出较高的抑菌活性，值得进一步研究开发。
　　关键词 番茄茎叶；抑菌活性；测定
　　
　　植物是天然产物农药的宝库，从植物中寻找新的杀菌抑菌活性物质，研制开发新型植物源杀菌剂，是当今世界新农药开发的热点。番茄属茄科茄属植物，是一种重要的农业栽培作物，每年产生大量目前尚不被利用的番茄茎叶。番茄茎叶散发着特殊气味，这些气味来自一些特殊的天然产物，早在 20世纪70~80年代，国外就开始研究其气味的组成。国内潘雪峰等利用气-质联机分析了番茄的挥发油组成，共分离出15个组分，鉴定了11种化合物[1]；孙莹等从其茎叶挥发油中分离出21种化合物，鉴定了其中14种[2]，这些化合物中含有一些农用活性物质；冯俊涛发现番茄茎叶丙酮提取物有抑菌活性[3]。本研究采用多种溶剂进行系统抽提，希望对番茄的抑菌活性作更全面的分析，为研制开发新型植物源杀菌剂提供线索和理论依据。
　　
　　1材料与方法
　　
　　1.1材料
　　1.1.1植物样品。将果实采摘后的番茄植株全株采收，置通风阴凉处令茎叶自然阴干，用组织捣碎机粉碎，过20目标准筛，冰箱中低温保存，备用。
　　1.1.2抽提溶剂。石油醚（60~90℃沸程）、苯、乙醚、丙酮、甲醇（以上试剂均为分析纯，莱阳康德化工厂生产）和无菌水（自制）。
　　1.1.3供试菌种。苹果腐烂病菌，苹果轮纹病菌，棉花枯萎病菌，葡萄白腐病菌。
　　1.2方法
　　1.2.1活性成分抽提。称取备用的番茄茎叶粉末60g，置于1 000mL具塞三角瓶中，加入石油醚500mL。将三角瓶置于低温（4℃）摇床上，静置2h，摇动2h，依此反复，共计12h。将提取液过滤至烧杯中，旋转蒸发仪减压浓缩至30mL，低温保存备用。将过滤残渣在瓷盘上摊开，自然晾干，然后加入另一种溶剂，用同样的方法提取。溶剂的加入顺序为：石油醚→苯→乙醚 →丙酮→甲醇→水。
　　1.2.2室内抑菌试验。采用生长速率法[4-5]。其中带毒培养基的制备是在无菌条件下，取1.2.1制备的抽提浓缩液3mL，加入到40℃左右的27mL PDA培养基中，充分振荡摇匀后即得。处理质量浓度为0.2g干材料/mL，以相应量的抽提溶剂加入到培养基中作为对照。
　　
　　2结果与分析
　　
　　抑菌试验结果见表1。
　　
　　由表1可以看出，番茄茎叶各提取液对4种供试菌总体有较好的抑制活性。
　　番茄茎叶石油醚抽提液对不同病原菌抑制作用差异显著。对葡萄白腐病菌抑制作用极强，抑菌率达100%；对苹果腐烂病菌也有极高的抑菌率，达89.64%；而对苹果轮纹病菌、棉花枯萎病菌抑制作用较差，抑菌率分别仅为25.42%、8.69%。
　　番茄茎叶苯抽提液对4种病原菌的抑制作用，仍以对葡萄白腐病菌和苹果腐烂病菌的作用显著，抑菌率分别达95.89%、88.93%。
　　番茄茎叶乙醚抽提液除对棉花枯萎病菌抑制效果较差外，对葡萄白腐病菌、苹果腐烂病菌、苹果轮纹病菌都有极强的抑制作用，抑菌率分别达100%、98.21%、86.01%。
　　番茄茎叶丙酮抽提液对供试病菌抑制作用同前。对葡萄白腐病菌、苹果腐烂病菌表现出极强的抑制作用，抑菌率分别高达95.54%、91.61%；对苹果轮纹病菌也有较好的抑菌作用，抑菌率为62.14%；对棉花枯萎病菌抑制作用最差，抑菌率为31.85%。
　　葡萄白腐病菌、苹果腐烂病菌被番茄甲醇抽提液完全抑制，抑菌率均达100%；对苹果轮纹病菌的抑制率也高达88.42%；对棉花枯萎病菌的抑制效果相对较差，抑菌率为42.50%。
　　番茄茎叶水的抽提液对供试菌抑制率均在55%以上，表现出较好的抑制活性。对葡萄白腐病菌抑菌效果最好，抑菌率达83.93%。这为我们开发水基化杀菌剂提供了试验依据。
　　
　　3结论与讨论
　　
　　（1）试验结果表明，番茄茎叶的石油醚、苯、乙醚、丙酮、甲醇、水等6种溶剂抽提液，对葡萄白腐病菌、苹果腐烂病菌、苹果轮纹病菌、棉花枯萎病菌有较高的抑菌活性，最高抑菌率分别为100%、98.21%、86.01%、88.42%。
　　（2）番茄茎叶中含有多种农用抑菌活性成分。对葡萄白腐病菌、苹果腐烂病菌而言，无论何种溶剂，从非极性强的石油醚、苯，到强极性的甲醇抽提液都表现出极强的抑菌活性，抑菌率几乎全在90%以上，甚至达100%。对苹果轮纹病菌而言，除极性最弱的石油醚、强极性的甲醇外，抑菌率均在60%以上，最高达86.01%。而棉花枯萎病菌的抑菌成分可能主要是极性化合物，对其抑菌活性随抽提溶剂的极性增强而增强，从石油醚时的抑菌率8.69%，提高到甲醇时的88.42%，其水抽提液的抑菌活性亦达65.48%。
　　（3）作为活性初筛，本研究仅选用4种供试菌，显然太少，活性成分可能漏筛。由文献[3]知，番茄茎叶丙酮抽提液对小麦赤霉病菌、番茄灰霉病菌、苹果炭疽病菌的抑制活性并不高，分别仅为62.2%、57.8%、25.3%，若我们就此得出番茄丙酮抽提液无活性，或活性太低，就完全可能漏掉活性成分。事实上，在我们的试验中，丙酮抽提液对葡萄白腐病菌、苹果腐烂病菌表现出极强的抑制作用，抑菌率分别高达95.54%、91.61%；对苹果轮纹病菌也有较好的抑菌作用，抑菌率为62.14%。因此，还应进一步扩大生测的范围。
　　（4）我国番茄茎叶资源丰富，目前尚未能开发利用。番茄茎叶抽提液具多种活性成分，对苹果腐烂病菌、苹果轮纹病菌、棉花枯萎病菌、葡萄白腐病菌的抑制率均很高。由此表明，番茄茎叶极具开发价值，对其深入研究可能发现多种新类型的杀菌剂先导化合物，也可能直接开发出新型的植物源杀菌剂。
　　
　　4参考文献
　　[1] 潘雪峰，杨明非，袁锋.番茄茎叶挥发物的气象色谱——质谱的定性分析[J].东北林业大学学报，2000，28（6）：119-120.
　　[2] 孙莹，卢志平，高松红，等.番茄挥发性成分的提取与鉴定[J]. 中国药物化学杂志，2001，11（5）：277-278.
　　[3] 冯俊涛，石勇强，张兴.56种植物抑菌活性筛选试验[J].西北农林科技大学学报，2001，29（2）：65-68.
　　[4] 慕立义.植物化学保护研究方法 [M].北京：中国农业出版社，1994.
　　[5] 孟昭礼，罗兰，袁忠林，等.人工模拟杀菌剂绿帝对8种植物病原菌的室内生测[J].莱阳农学院学报，1998，15（3）：159-162.
　　
　　注：“本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文。”
　　

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